PCR管/板有多種顏色,如透明色、白色、黃色、藍色、紅色……普通的PCR過(guò)程中,管/板的顏色并不會(huì )影響PCR的結果,但是在qPCR中,管/板的顏色對于結果是有很大的影響的。
應用于qPCR的耗材,一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA擴增反應中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次PCR循環(huán)后產(chǎn)物總量,因此與透明塑料管/板相比,白色或磨砂的管/板在應對熒光時(shí)表現更為靈敏,并且結果更加準確。這是因為白色的耗材可以阻止熒光折射出管,達到熒光折射的最小化,將更多的熒光信號反射回檢測器,從而增加信噪比,表現為更高的靈敏度;另外,白色管壁也可阻止熒光信號被PCR儀的加熱模塊吸收或進(jìn)一步反射,從而可以降低重復實(shí)驗中的誤差,提高準確性。除此之外,在進(jìn)行qPCR時(shí)需使用超透明的管蓋或光學(xué)密封膜來(lái)密封PCR管/板,保證熒光不受干擾;還需要參考qPCR的耗材要求,選擇最合適的耗材,達到優(yōu)的實(shí)驗效果。