雖然蛋白質(zhì)是由mRNA翻譯而來,但mRNA的表達(dá)水平總是與蛋白質(zhì)的表達(dá)水平一致嗎?做實(shí)驗任何一個結(jié)果如果你驗證了幾遍都是一樣,那么請不要懷疑自己,也許不是你做錯了,讓我們一起去解釋這種現(xiàn)象吧!
一、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控
mRNA在轉(zhuǎn)錄后可以經(jīng)歷多種調(diào)控過程,如剪接、編輯、降解和穩(wěn)定性調(diào)控。這些過程可以影響mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。
二、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性
蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性受多種因素影響,包括蛋白質(zhì)的降解速率、糖基化修飾、磷酸化等翻譯后修飾。如果蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性降低,即使mRNA水平較高,蛋白質(zhì)水平也可能較低。
三、翻譯效率
mRNA的翻譯效率可能受到多種因素的影響,如mRNA的5'帽子結(jié)構(gòu)、多聚腺苷酸尾部長度、核糖體結(jié)合位點(diǎn)的序列等。這些因素可以影響核糖體對mRNA的識別和結(jié)合,進(jìn)而影響蛋白質(zhì)的合成。
四、蛋白質(zhì)合成與降解的動態(tài)平衡
蛋白質(zhì)的合成和降解是一個動態(tài)平衡過程。如果蛋白質(zhì)降解速率增加或合成速率降低,即使mRNA水平?jīng)]有變化,蛋白質(zhì)水平也可能降低。
五、細(xì)胞應(yīng)激和環(huán)境因素
細(xì)胞在面對不同的應(yīng)激條件或環(huán)境因素時,可能會調(diào)整其蛋白質(zhì)合成和降解的速率,以適應(yīng)環(huán)境變化。
六、實(shí)驗技術(shù)的差異
qRT-PCR和Western blot是兩種不同的實(shí)驗技術(shù),它們對樣品的處理、檢測靈敏度和特異性都有所不同,這可能導(dǎo)致檢測結(jié)果的差異。
七、舉例
RNA水平升高了,蛋白水平有時候降低了的原因:
1 蛋白質(zhì)的表達(dá)不僅受到轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控,還受到多種轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機(jī)制的影響,包括如剪接、編輯、降解和穩(wěn)定性調(diào)控,這些過程可以影響mRNA和蛋白表達(dá)不一致。
2 即使mRNA水平很高,如果mRNA的翻譯啟動位點(diǎn)被序列或結(jié)構(gòu)上的元素阻塞,或者存在影響翻譯的調(diào)控因子,翻譯效率也可能降低,最終蛋白質(zhì)表達(dá)水平降低。
3 蛋白質(zhì)的半衰期在不同條件下也會顯著性變化,一些蛋白質(zhì)在特定信號下可能會更快地降解,即使mRNA水平很高。
4 細(xì)胞內(nèi)的一些反饋機(jī)制可能通過降低特定蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性或翻譯效率來響應(yīng)mRNA水平的升高,以此來維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。
八、RD蛋白部分表
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 價格 |
重組猴痘病毒H3L His-tag蛋白 | 詢價 | |
重組猴痘病毒A30L Fc嵌合體蛋白 | 詢價 | |
314-BP | 重組人BMP-4蛋白 | 詢價 |
338-AC | 重組人/小鼠/大鼠激活素A蛋白 | 詢價 |
416-ML | 重組鼠M-CSF 蛋白 | 詢價 |
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