一、凡知醫(yī)學(xué)高保真PCR預(yù)混液目錄表
貨號 | 產(chǎn)品 | 規(guī)格 |
FG2207 | 1ml |
二、凡知醫(yī)學(xué)高保真PCR預(yù)混液原理
凡知高保真PCR預(yù)混液的原理主要基于PCR技術(shù)、高保真DNA聚合酶的使用,以及特定的緩沖體系和添加劑,以確保高特異性和高保真性。
1. PCR技術(shù)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),這是一種在體外酶促擴增特定DNA片段的技術(shù),類似于DNA的天然復(fù)制過程。PCR技術(shù)利用一對與模板DNA兩端互補的寡核苷酸引物,在DNA聚合酶的作用下,沿著模板鏈延伸至完成新的DNA合成,不斷地重復(fù)這一過程,使目的DNA片段以指數(shù)級進行擴增。引物與DNA片段的特異結(jié)合決定了擴增的特異性。其主要過程由變性、退火和延伸三個步驟反復(fù)循環(huán)組成,每循環(huán)一次,雙鏈DNA分子數(shù)量即增加一倍?。
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2. 高保真DNA聚合酶
凡知高保真PCR預(yù)混液包含Hieff Canace Plus High-Fidelity DNA Polymerase,這是一種具有高保真性的酶,其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。這種酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,后者能夠校正錯誤,從而提高PCR產(chǎn)物的保真性。預(yù)混液中還添加了延伸因子,使得該酶具有長片段擴增能力,擴增目的片段的長度可達13 kb。
3. 特定的緩沖體系和添加劑
預(yù)混液中添加了常溫可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的兩種單克隆抗體,這簡化了實驗步驟,使得高特異性的Hot Start PCR變得簡便易行。凡知醫(yī)學(xué)的高保真PCR預(yù)混液還可能包含電泳指示染料,使得PCR產(chǎn)物可以直接進行電泳檢測,簡化了實驗步驟,提高了實驗效率。此外,該產(chǎn)品還可能含有特異保護劑,使得預(yù)混液在反復(fù)凍融后仍能維持穩(wěn)定活性,保證了實驗的可靠性和重復(fù)性?。該預(yù)混液還具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,反應(yīng)體系只需加入引物和模板即可,并通過兩步法的程序進行擴增。產(chǎn)品中還含有電泳指示染料,使得PCR產(chǎn)物可直接進行電泳檢測。此外,該產(chǎn)品還含有特異保護劑,使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。
總的來說,凡知高保真PCR預(yù)混液通過使用PCR技術(shù)、高保真DNA聚合酶以及電泳指示染料和特異保護劑的添加,實現(xiàn)了高效、高保真的PCR擴增反應(yīng),適用于復(fù)雜模板的擴增,擴增產(chǎn)物為平末端,為分子生物學(xué)研究提供了高效且可靠的工具。
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